對此人們紛紛猜測蒙娜麗莎沒有眉毛的原因，首先認為：原來畫中人物是有眉毛的，達芬奇為了創作需要故意不畫眉毛 ， 因為畫眉毛致使整個面部不協調，繪畫中的“三庭五眼”受到破壞 ， 影響美感，所以達芬奇沒有畫眉毛 。
【為什么蒙娜麗莎的畫像沒有眉毛?】第二個原因就是畫中人物原來有眉毛，只是油畫經過長時間的放置，導致油畫掉色脫落 。有專家把《蒙娜麗莎》放大了數倍觀察，發現蒙娜麗莎的左眼經放大之后 ， 顯示出其眉毛區域有細微的一筆，所以從邏輯上講，蒙娜麗莎不是沒有眉毛，而只不過眉毛只有細細的一筆而已 。這幅畫經過幾百年的時間，這么淡淡的一筆眉毛已經掉色了 。
第三個原因就是后人在修復的時候涂抹掉了，經過放大觀察 ， 發現眼睛周圍的裂縫已經消失，這說明這幅畫被后人修復過，可能在清潔和修復的過程中，眉毛被擦掉了 。

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