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質(zhì)粒拯救 質(zhì)粒拯救的轉(zhuǎn)化宿主有要求嗎


質(zhì)粒拯救 質(zhì)粒拯救的轉(zhuǎn)化宿主有要求嗎

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大家好,小豆豆來(lái)為大家解答以上的問(wèn)題 。質(zhì)粒拯救的轉(zhuǎn)化宿主有要求嗎,質(zhì)粒拯救這個(gè)很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!
1、質(zhì)粒救援轉(zhuǎn)化是質(zhì)粒轉(zhuǎn)化枯草桿菌特有的方法 。
2、在此轉(zhuǎn)化中,質(zhì)粒以單鏈形式進(jìn)入感受態(tài)細(xì)胞的 。
3、單體質(zhì)粒DNA和感受態(tài)細(xì)胞接觸時(shí) , 在核酸酶作用下被切開(kāi) , 只有一條DNA鏈能夠進(jìn)入細(xì)胞 。
4、這條鏈進(jìn)入細(xì)胞后由于沒(méi)有另外一條質(zhì)粒DNA鏈迅速與其配對(duì)而被降解,所以沒(méi)有轉(zhuǎn)化活性 。
5、寡聚型的質(zhì)粒DNA分子在進(jìn)入感受態(tài)細(xì)胞以后,線性DNA分子中的同源部分進(jìn)行分子內(nèi)的重組 , 并環(huán)化生成一個(gè)完整的質(zhì)粒分子,不會(huì)被分解而有轉(zhuǎn)化活性;質(zhì)粒中如果具有與枯草桿菌同源的部分,質(zhì)粒單鏈DNA進(jìn)入感受態(tài)后可以與同源的片段配對(duì)形成雙鏈,保護(hù)質(zhì)粒 。
6、所以可以通過(guò):1構(gòu)建寡聚型的質(zhì)粒DNA分子(酶切后用連接酶連接);2在質(zhì)粒中加入同源片段構(gòu)建雜種質(zhì)粒(質(zhì)粒片段越大,轉(zhuǎn)化效率越高 。
7、當(dāng)然是在一定限度內(nèi)) 。
【質(zhì)粒拯救 質(zhì)粒拯救的轉(zhuǎn)化宿主有要求嗎】8、這種轉(zhuǎn)化方法稱(chēng)質(zhì)粒救援轉(zhuǎn)化 。
9、參考資料:枯草芽孢桿菌中的分子克隆和單體雜種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的研究陳乃用等應(yīng)用于發(fā)酵工業(yè)的DNA重組技術(shù) 王貴宏等應(yīng)用于基因篩選的穿梭質(zhì)粒,彌補(bǔ)基因撞擊或環(huán)境突變、提供基因劑量、促進(jìn)基因操作,還可以應(yīng)用于蛋白干擾分析 。
10、質(zhì)粒拯救我也不熟悉,只知道是反向遺傳的一種方法 。
11、具體的可以查看:利用8質(zhì)粒系統(tǒng)拯救A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株禽流感病毒 石火英 微生物學(xué)報(bào) 2005/03 這篇文章有具體的例子 。
12、 | 。
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