分光光度計的基本知識介紹

    分光光度計的基本工作原理是基于物質對光(對光的波長)的吸收具有選擇性 , 不同的物質都有各自的吸收光帶 , 所以 , 當光色散后的光譜通過某一溶液時 , 其中某些波長的光線就會被溶液吸收 。 在一定的波長下 , 溶液中物質的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關系 , 即符合比爾定律 。
分光光度計的構造
分光光度計允許的測定波長范圍在360~800nm , 其構造比較簡單 , 測定的靈敏度和精密度較高 。 因此 , 應用比較廣泛 。 721型分光光度計的儀器構造見下圖 。
從光源燈發出的連續輻射光線 , 射到聚光透鏡上 , 會聚后 , 再經過平面鏡轉角90° , 反射至入射狹縫 。 由此入射到單色器內 , 狹縫正好位于球面準直物鏡的焦面上 , 當入射光線經過準直物鏡反射后 , 就以一束平行光射向棱鏡 。 光線進入棱鏡后 , 進行色散 。 色散后回來的光線 , 再經過準直鏡反射 , 就會聚在出光狹縫上 , 再通過聚光鏡后進入比色皿 , 光線一部分被吸收 , 透過的光進入光電管 , 產生相應的光電流 , 經放大后在微安表上讀出 。
分光光度計的使用方法
①首先接通電源 , 打開電源開關1 , 指示燈亮 , 打開比色皿暗箱蓋8 , 預熱20分鐘 。
②波長選擇旋鈕6 , 選擇所需的單色光波長 , 用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔 。
③放入比色皿 , 旋轉零位旋鈕5調零 , 將比色皿暗箱蓋合上 , 推進比色皿拉桿3 , 使參比比色皿處于空白校正位置 , 使光電管見光 , 旋轉透光率調節旋鈕4 , 使微安表9指針準確處于100% 。 按上述方法連續幾次調整零位和100%位 , 即可進行測定工作 。
分光光度計使用和維護中應注意事項:
①連續使用儀器的時間不應超過2小時 , 最好是間歇0.5小時后 , 再繼續使用 。
②比色皿每次使用完畢后 , 要用去離子水洗凈并倒置晾干后 , 存放在比色皿盒內 。 在日常使用中應注意保護比色皿的透光面 , 使其不受損壞或產生劃痕 , 以免影響透光率 。
③儀器不能受潮 。 在日常使用中 , 應經常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色 , 如硅膠的顏色已變紅 , 應立即取出烘干或更換 。
④在托運或移動儀器時 , 應注意小心輕放 。