劃線的形式有多種，可將一個(gè)平板分成四個(gè)不同面積的小區(qū)進(jìn)行劃線，第一區(qū)（A區(qū)）面積最小，作為待分離菌的菌源區(qū) ， 第二和第三區(qū)（B、C區(qū)）是逐級稀釋的過渡區(qū),第四區(qū)（D區(qū)） ， 則是關(guān)鍵區(qū)，使該區(qū)出現(xiàn)大量的單菌落以供挑選純種用 。為了得到較多的典型單菌落，平板上四區(qū)面積的分配應(yīng)是D>C>B>A 。
注意事項(xiàng)：
【劃線分離時(shí)要注意哪些】平板不能倒得太薄，最好在使用前一天倒好 。為防止平板表面產(chǎn)生冷凝水，倒平板前培養(yǎng)基溫度不能太高 。用于平板劃線的培養(yǎng)基，瓊脂含量宜高些，否則會(huì)因平板太軟而被劃破 。用于劃線的接種環(huán) ， 環(huán)柄宜長些，環(huán)口應(yīng)十分圓滑，劃線時(shí)環(huán)口與平板間的夾角宜小些，動(dòng)作要輕巧，以防劃破平板 。為了取得良好的劃線效果，可事先用圓紙墊在空培養(yǎng)皿內(nèi)畫上4區(qū)，并用接種環(huán)練習(xí)劃線動(dòng)作，待通過模擬試驗(yàn)熟練操作和掌握劃線要領(lǐng)后，再正式進(jìn)行平板劃線 。

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