啟動子啟動子和終止子 _知識經驗

文章插圖
大家好,小跳來為大家解答以上的問題。啟動子和終止子，啟動子這個很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧！
1、原核表達系統中通常使用的可調控的啟動子有Lac(乳糖啟動子)、Trp(色氨酸啟動子)、Tac(乳糖和色氨酸的雜合啟動子) 、lPL (l噬菌體的左向啟動子)、T7噬菌體啟動子等。
2、（1）Lac啟動子：它來自大腸桿菌的乳糖操縱子，是DNA分子上一段有方向的核苷酸序列，由阻遏蛋白基因(LacI)、啟動基因(P)、操縱基因(O)和編碼3個與乳糖利用有關的酶的基因結構所組成。
3、Lac啟動子受分解代謝系統的正調控和阻遏物的負調控。
4、正調控通過CAP(catabolite gene activation protein)因子和cAMP來激活啟動子，促使轉錄進行。
5、負調控則是由調節基因產生LacZ阻遏蛋白，該阻遏蛋白能與操縱基因結合阻止轉錄。
6、乳糖及某些類似物如IPTG可與阻遏蛋白形成復合物，使其構型改變，不能與O基因結合，從而解除這種阻遏，誘導轉錄發生。
7、（2）trp啟動子：它來自大腸桿菌的色氨酸操縱子，其阻遏蛋白必須與色氨酸結合才有活性。
8、當缺乏色氨酸時，該啟動子開始轉錄。
9、當色氨酸較豐富時，則停止轉錄。
10、b-吲哚丙烯酸可競爭性抑制色氨酸與阻遏蛋白的結合，解除阻遏蛋白的活性，促使trp啟動子轉錄。
11、（3）Tac啟動子：Tac啟動子是一組由Lac和trp啟動子人工構建的雜合啟動子，受Lac阻遏蛋白的負調節，它的啟動能力比Lac和trp都強。
12、其中Tac 1是由Trp啟動子的－35區加上一個合成的46 bp DNA片段(包括Pribnow 盒)和Lac操縱基因構成，Tac 12是由Trp的啟動子-35區和Lac啟動子的-10區，加上Lac操縱子中的操縱基因部分和SD序列融合而成。
13、Tac啟動子受IPTG的誘導。
14、（4）lPL啟動子：它來自l噬菌體早期左向轉錄啟動子，是一種活性比Trp啟動子高11倍左右的強啟動子。
15、lPL啟動子受控于溫度敏感的阻遏物 cIts857 。
16、在低溫(30℃)時，cIts857阻遏蛋白可阻遏PL啟動子轉錄。
17、在高溫(45℃)時，cIts857蛋白失活，阻遏解除，促使PL啟動子轉錄。
18、系統由于受cIts857作用，尤其適合于表達對大腸桿菌有毒的基因產物，缺點是溫度轉換不僅可誘導PL啟動子，也可誘導熱休克基因，其中有一些熱休克基因編碼蛋白酶。
19、如果用l噬菌體cI+溶源菌，并用絲裂霉素C或萘啶酮酸進行誘導，可緩解這一矛盾。
20、（5）T7噬菌體啟動子：它是來自T7噬菌體的啟動子，具有高度的特異性，只有T7RNA聚合酶才能使其啟動，故可以使克隆化基因獨自得到表達。
21、T7RNA聚合酶的效率比大腸桿菌 RNA聚合酶高5倍左右，它能使質粒沿模板連續轉錄幾周，許多外源終止子都不能有效地終止它的序列，因此它可轉錄某些不能被大腸桿菌RNA聚合酶有效轉錄的序列。
22、這個系統可以高效表達其他系統不能有效表達的基因。
23、但要注意用這種啟動子時宿主中必須含有T7RNA聚合酶。
24、應用T7噬菌體表達系統需要2個條件：第一是具有T7噬菌體RNA聚合酶，它可以由感染的l噬菌體或由插入大腸桿菌染色體上的一個基因拷貝產生；第二是在一個待表達基因上游帶有T7噬菌體啟動子的載體。
【啟動子啟動子和終止子】本文到此分享完畢，希望對大家有所幫助。

啟動子 啟動子和終止子

啟動子啟動子和終止子