1、切割質粒和目的基因的限制酶必須是同-.種酶，以獲得相同的黏性末端，利于重組質粒的構建 。插入的目的基因只是結構基因部分，其表達需要調控序列，因而用作載體的質粒的插入部位前須有啟動子，后須有終止子 。
【基因表達載體的構建】2、通過載體把目的基因片段導入活細胞 。構建基因表達載體也就是把目的基因和載體連接，使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用 。
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