陽性克隆 陽性克隆鑒定的方法有哪些


陽性克隆 陽性克隆鑒定的方法有哪些

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1、簡單的說一下:1.擴增目的基因,比如通過PCR的方法 。
2、擴增的序列可以通過酶切或者TOPOTA的方法插入到載體質粒 。
3、3.轉染大腸桿菌4.篩選陽性克隆一般常采用藍白克隆方法,就是在載體上,序列的插入位置本來是一個完整編碼β-gal這個酶的序列,如果不被破壞,產生的酶可以降解細菌培養盤上的底物,形成藍色產物 。
4、如果有目的序列插入,這個酶就不能表達,形成的克隆就是白色的 。
5、5.挑取陽性克??,矎T蛉啡銜薇湟旌頭較蠔? ,擴增質粒,提純質粒 。
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