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1、選用活躍生長期菌種染色，老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性 。
2、涂片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性 。
【革蘭氏染色注意事項 細菌的簡單染色和革蘭氏染色注意事項】3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性 。
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