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1、(1)取材料,加液氮研磨成粉末狀,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;(2)加入800 μl的CTAB提取緩沖液,混勻(CTAB在65℃水浴預熱),每5min輕輕震蕩幾次,20min后12000 r/min,離心15 min;(3)小心吸取上清液,加入等體積的酚:氯仿(各400μl)溶液 , 混勻,4℃ , 12000 r/min,離心10 min;(4)小心吸取上清液 , 加入等體積的氯仿,混勻,4℃ , 12000 r/min,離心10 min 。
2、(5)重復步驟(4)1-2次,以蛋白層不出現為止;(6)取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min , 離心10 min;(7)棄去上清液,用70%乙醇洗滌沉淀2次;(8)室溫下干燥后(一般干燥5-15 min),溶于30-50 μl DEPC去離子水中,于-20℃或者-70℃下保存備用 。
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