細胞融合的基本原理和方法


細胞融合的基本原理和方法

文章插圖
1、病毒誘導助融:
【細胞融合的基本原理和方法】細胞融合在自然界是存在的,細胞融合研究首先也是基于自發的細胞融合,1957年 , 岡田善雄意外發現仙臺病毒,能誘導懸液中艾氏腹細胞融合,然后Harris、Kada等用于誘導種間細胞融合,獲得成功 。
2、化學助融:
1972年,卡爾森首先用硝酸鈉進行煙草兩個種的細胞原生質體的融合,1974年Kao等首先發現聚乙二醇能誘導植物細胞原生質體融合產生雜交細胞 。1975年Pentecorvo , 發現聚乙二醇亦能幫助哺乳類動物細胞的融合,1976年Davidson更進一步證實這一結果,并且認為其具有簡單快速、高效率等優點 。因而,1975年之后聚乙二醇就逐漸取代了仙臺病毒.
3:電融合法:
電融合法是70年代未期和80年代初期發展起來的一種新的細胞融合方法 。Senda在1970年首先應用電脈沖,通過微電極在顯微鏡下使植物細胞融合,奠定電融合技術基礎 。
4、激光誘導卵細胞融合:
激光誘導卵細胞融合是最新的細胞融合方法 , 該法為張聞迪等人首先應用,他們利用激光微束的單色性、高功率密度、短脈寬和極小的作用范圍等特點 。對泥鰍受精卵進行融合試驗,獲得成功,且融合后的細胞可存活發育,經卵裂期、囊胚期、原腸期、孵化期、直至幼魚 。整個過程可通過顯微鏡觀察,還可同時由電視攝象監視器觀察和進行照相記錄 。.