pgl3basic載體圖譜 _經驗分享

如何利用pGL3質粒驗證一段DNA序列是否具有啟動子活性?可以將pcr擴增好的DNA序列通過酶切連接的方式插入到pGL3載體的多克隆位點，拿到重組載體后，轉化細胞，檢測熒光變化，如果熒光比值明顯增大，說明這一段DNA具有啟動子活性。
空載pgl3-basic雙熒光素酶會表達嗎將構建pCMV-Luc和pTK-Luc以及商品化的pGL3-control（SV40啟動子驅動）,分別與SV40（pBIND）和TK（pRL-TK）兩種啟動子驅動的兩種內參質粒共轉染入HEK293細胞;觀察過表達組成性活化NFAT后相對熒光素酶活性讀數的改變。
結果：成功。

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求助pGL3-basic質粒Sanger測序引物選擇先連接T載體是為了提高轉化效率一般來說市面上出售的T載體都進行了優化，容易連接片段（也就是效率較高），因此構建表達載體時有時會先連接T載體。
同時T載體的測序引物比較明確（商業化的緣故），因此測序也方便一些。
更重要。
PGL3-basic Vector 中有EcoR I酶切位點嗎可以下載PGL3-basic Vector的technical mannual (Part# TM033)在第18頁上，可以查到一個表格：Table 4. Restriction Enzymes That Cut the pGL3-Basic Vector Between 1 and 5 Times.從這個列表上看，這個載體上沒有EcoRI 。

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PGL3 promoter和enhancer用途上的區別?【pgl3basic載體圖譜】在說明書上看圖譜上的區別但是還是不是很理解什么時候選用 PGL3 promo 。PGL3 promoter就是用于插入自己的enhancer證明enhancer作用的 PGL3 enhancer是用來插入自己的promoter做promoter實驗的，所以promoter實驗用pGL3-basic其實也是可以的