體外轉錄的步驟有哪些

轉錄通常發生在生物體內,如果我們將含有RNA轉錄酶、NTP等條件,在體外無細胞系統中,用DNA作為模板,模仿體內轉錄過程生成RNA,這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄后RNA的用途,該技術被稱為體外轉錄 。
體外轉錄的步驟如下:
1、 提取cDNA質粒;
2、 線性化質粒;
【體外轉錄的步驟有哪些】3、 純化質粒: 加等體積的Tris苯酚氯仿到100微米限制內切酶消化體系,渦旋振蕩20秒, 13000克離心5分鐘 。上清轉移,加入2倍體積無水乙醇和1比10體積的的