鏈終止法原理

【鏈終止法原理】通過合成與單鏈DNA互補的多核苷酸鏈,由于合成的互補鏈可在不同位置隨機終止反應,產生只差一個核苷酸的DNA分子,從而來讀取待測DNA分子的順序 。核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧堿基存在條件下復制或轉錄時,如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧堿基,只要雙脫氧堿基摻入鏈端,該鏈就停止延長,鏈端摻入單脫氧堿基的片段可繼續延長,如此每管反應體系中便合成以共同引物為5端,以雙脫氧堿基為3端的一系列長度不等的核酸片段 。反應終止后,分四個泳道進行電泳 。以分離長短不一的核酸片段,根據片段3端的雙脫氧堿