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小伙伴們好,最近小跳發現有諸多的小伙伴們對于蛋白檢測這個都頗為感興趣的,那么小跳今天就來為大家梳理下具體的一些信息一起來看看吧 。
1、凱氏定氮法
2、凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮含量的方法 。即在催化劑的存在下,樣品中的有機氮用濃硫酸消化轉化為無機銨鹽,然后銨鹽在堿性條件下轉化為氨 , 用水蒸氣蒸餾出來,用過量的硼酸溶液吸收,再用標準鹽酸滴定,計算出樣品中的氮含量 。
3、因為蛋白質中的氮含量是相對恒定的,所以可以從其氮含量計算出蛋白質的含量,所以這種方法是一種經典的蛋白質定量方法 。
4、縮二脲法
5、縮二脲法是一種用于鑒定蛋白質的分析方法 。縮二脲試劑是一種堿性含銅試液,呈藍色,由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制而成 。
6、當底物含有肽鍵(多肽)時,試液中的銅與多肽配位,絡合物呈紫色 。濃度可通過比色法分析 , 紫外-可見光譜中的波長為540nm 。識別反應的靈敏度為5-160毫克/毫升 。反應蛋白單位為1-10毫克 。
7、苯酚試劑法
8、取6支試管,分別貼上標簽 。前五個試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液 。最后一個試管加入待測蛋白溶液,沒有標準蛋白溶液 。在室溫下放置30分鐘 。以第一個不含蛋白溶液的試管為空白對照,在650nm波長處測量每個試管中溶液的吸光度 。
9、紫外線吸收法
10、大多數蛋白質在280nm波長處具有特征性的最大吸收,這是由于蛋白質中存在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸 。可用于測定0.1 ~ 0.5 mg/ml蛋白質溶液的含量 。
11、取9支試管,分別貼上標簽 。前8個試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,第一個試管不加入標準蛋白溶液,最后一個試管加入待測蛋白溶液,不加入標準蛋白溶液 。每個試管中的液體總量是通過加入蒸餾水來彌補而保持一致的 。將液體混合均勻,在280nm波長下進行比色分析,記錄吸光度值 。
12、科斯亮藍法
13、考馬斯亮藍顯色法的基本原理是蛋白質能與考馬斯亮藍G-250定量結合 。考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合后,其可見光最大吸收峰從465nm變為595nm 。
14、當考馬斯亮藍G-250的濃度過量且恒定時 , 當溶液中蛋白質的濃度不同時,不同量的考馬斯亮藍G-250會從465nm的吸收峰形式變為595nm的吸收峰形式 , 這種變化有一定的定量關系 。
15、一般來說,當溶液中蛋白質的濃度增加時 , 顯色溶液在595nm處的吸光度基本上可以線性增加 。因此,考馬斯亮藍G-250顯色法可用于測定溶液中蛋白質的含量 。
【蛋白檢測 蛋白檢測儀】本文到此結束,希望對大家有所幫助 。
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