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瓊脂糖凝膠電泳條帶分析 瓊脂糖凝膠電泳條帶特別淡

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瓊脂糖凝膠電泳條帶分析 瓊脂糖凝膠電泳條帶特別淡

文章插圖
大家好,小跳來為大家解答以上的問題 。瓊脂糖凝膠電泳條帶特別淡，瓊脂糖凝膠電泳條帶分析這個很多人還不知道,現在讓我們一起來看看吧！
1、條帶分開的程度看你實驗的需求 。
2、如果你的Marker相鄰兩個條帶相差100bp，而你的樣本陽性結果和多帶一個內含子的假陽性結果只差50bp（比方說你在做反轉錄PCR實驗)那你當然需要分清楚一些 。
3、否則的話只要看得清楚你的樣本條帶是位于那兩個Marker條帶之間就可以了 。
4、想要分開些跟膠厚度，點樣都沒有關系 。
5、提高瓊脂糖濃度確實有影響，但不是一個線性的關系，瓊脂糖濃度決定哪個大小范圍的分得最開 ， 不是所有條帶都相同程度的分開，唉 ， 看擺渡百科吧“2、 瓊脂糖濃度一個給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同 。
6、DNA電泳遷移率的對數與凝膠濃度成線性關系 。
7、凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小 。
8、分離小于0.5kb的DNA片段所需膠濃度是1.2-1.5%,分離大于10kb 的DNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%, DNA片段大小間于兩者之間則所需膠濃度為0.8-1.0% 。
9、”選定瓊脂糖濃度的情況下，跑得時間越久分得越開 。
10、在電泳開始時使用低壓有利于條帶清晰，是因為點樣之后樣品內分子是胡亂排列的，加上電壓之后才統一方向排列好 。
11、所以一小段時間的低壓讓它們都排列好 ， 再轉高壓能夠同時起跑 。
12、不然的話好比起跑線上有些人背對著終點站有些人面對有人側對，結果一聲槍響，本來同樣速度的人跑出不同的結果來--同樣大小的分子跑出來不在嚴格一條線，條帶當然不完美咯 。
13、 ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~哇，不好意思跟蛋白質電泳搞混了 。
14、其實一般不用放低壓啦，尤其你才跑30分鐘 。
15、不過你的電壓比我高很多 。
16、我一般是100V跑45分鐘，但是電壓跟膠的大小有關啦 。
17、只要跑出來結果沒問題，就不要隨意改動實驗條件了 。
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