血清知識大盤點( 二 )


10馬血清
10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應答,常與牛血清結合或單獨作為哺乳動物細胞培養的補充培養基 。
11豬血清
豬血清在染色體研究中表現非常出色 , 可用于淋巴細胞培養,疫苗生產(生產支原體),中和脂質體包裹的腺相關病毒(AAV),用于誘導大鼠肝纖維化,作為酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中的標準陰性參考 。
12兔血清
正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照 。 在免疫組織化學和免疫細胞化學方面 , 各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑 。
13羊血清用于生物醫學研究的大多數細胞系和原代培養物上 , FBS的合適替代物 , 病毒分離和鑒定 , 病毒學研究 。 用作魚類細胞培養的有效NBCS替代物 。 可成功地代替胎牛血清在生長培養基中長期用于環孢蘑菇的體外繁殖 。
胎牛血清成分已知的已有上千多種 , 以下為主要成分表:
成分
濃度
成分
濃度
蛋白和多肽
血清知識大盤點】-磷脂
0.7-3.0mg/ml
白蛋白
20-50mg/ml
丙酮酸
2-10ug/ml
胎球蛋白
10-20mg/ml
碳水化合物
-纖連蛋白
1-10ug/ml
葡萄糖
0.6-1.2mg/ml
球蛋白
1-15mg/ml
乳酸
0.5-2.0mg/ml
α-抗胰蛋白酶
0.5-2.5mg/ml
多胺
轉鐵蛋白
2-4mg/ml
丁二胺,亞精胺
0.1-1.0uM
生長因子
-
尿素
170-300ug/ml
EGF,PDGF,IGF-I,IL-1
1-100ng/ml
無機物
-氨基酸
0.01-1.0uM鈣 , 氯化物 , 鉀 , 磷
-脂質
-
激素
-膽固醇
10uM
胰島素
1-100ng/ml
脂肪酸
0.1-1.0uM
皮質醇
10-200nM
亞油酸
0.01-0.1uM
維生素
10ng-10ug/ml
各位老師可以根據自己的實驗需求選擇不同的血清 。
★我們同時為您收集了一些使用血清時的典型問題:
01
血清的顏色如何?
為何有的胎牛血清顏色偏紅 , 而有的偏黃?是因為胎牛血清顏色是由血紅蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的 , 主要是受血紅蛋白影響 。 血紅蛋白含量很低時 , 含少量膽紅素 , 呈淡黃或金黃 。 血紅蛋白含量高時 , 會呈現淡紅色 。
需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年) 。 若存放于4℃ , 請勿超過1個月 , 若一次無法用完一瓶 , 建議將血清無菌分裝并冷凍 。
02
血清如何解凍 , 使用前是否需要過濾?
血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天 , 然后移入室溫 , 待全部溶解后再分裝 。 在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡) , 減少沉淀生成 。 切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍 , 這樣因溫差較大易造成蛋白質凝結并出現沉淀 。
本公司血清在ISO13485認證的廠房中生產 , 經過3次0.1μm過濾 , 出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養測試及無菌檢測 , 污染幾率非常非常非常(重要的事情說三遍)低 。 通常細胞污染有非常多的可能性 , 根據協助使用者進行分析檢測 , 結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染 。 因此買來的血清不需要再次進行過濾 。
下圖為人肉眼和光學顯微鏡所能觀察到的微粒大小 。 由于我們的血清是經過3次0.1μm過濾 , 因此若肉眼可以觀察到異物時 , 可以考慮:是否血清溶解后蛋白質凝集是否操作時導入污染物
血清知識大盤點
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03
為什么血清中會有沉淀生成 , 主要成分是什么 , 會對實驗有什么影響?