血清知識大盤點( 三 )


血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀) , 胎球蛋白[1] , 脂蛋白 , 冷凝集素 , 玻連蛋白 , 磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉淀) , 膽固醇等 。
原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變 。 熱滅活 , 反復凍融 , 長期儲存于2-8℃或者室溫 。
預防:非必要 , 不用熱滅活;避免反復凍融;-20℃保存;4℃全融(期間間斷搖晃均勻);2000rpm離心5分鐘(不建議用0.2um濾膜過濾) , 取上清使用 。
關于血清
根據多年的實驗研究顯示 , 血清中的沉淀物不會影響細胞培養 。
BI原廠 , ATCC(美國菌種保藏中心)實驗也是相同的結果 。
血清知識大盤點
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04
黑膠蟲是來源于血清嗎?
目前科學界對黑膠蟲的身份并無定論,通常是顯微鏡下觀察到密密麻麻的小黑點在培養基中自主游動 , 就稱為黑膠蟲污染 。 本公司技術服務部”Dr.Cell”目前檢測的數十個所謂”黑膠蟲”樣本 , 其中62%為細菌(如Sphingomonaspaucimobilis , Blastomonasnatatoriastrain) , 38%為支原體(如:Mycoplasmahyorhinis , Mycoplasmapulmonisstrain) 。 黑膠蟲在鏡下的典型特征呈卵圓狀、球狀、桿狀等 , 可引起細胞生長遲緩或裂解凋亡 。 目前沒有充分的數據表明黑膠蟲來源于血清 , 因為其尺寸遠大于血清過濾時所用的0.1微米(μm)濾膜 。 建議各位老師通過使用三抗(Cat#:03-032-1B)外加支原體處理試劑(Cat#:03-038-1B)嘗試殺滅黑膠蟲 。
05
血清存在批間差嗎?
因為血清來源于動物 , 其組成成分有1000種左右 , 且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異 。 每個批號的組分和百分比含量都是不固定的 , 所以批間差異是存在的 。
建議先進行批號測試 , 篩選出合適批號 , 購買半年甚至一年以上的用量 , 避免批間差造成實驗波動(胎牛血清在-20℃保存可達5年) 。
在生物細胞學研究中 , 有時需要體外培養和分析癌細胞 。 細胞要養好 , 就要用好血清 , 如Ausbian?特級進口胎牛血清 , 它的內毒素小于3Eu/ml , 使細胞更健康 , 客戶做實驗更加順利 。
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文章來源于:逍鵬生物
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