一雙“慧眼”看穿凍卵活性,拉曼光譜的確“靠譜”( 四 )


一雙“慧眼”看穿凍卵活性,拉曼光譜的確“靠譜”
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圖6從指紋光譜區域獲得的在-25℃條件下冷凍在PG溶液中的卵母細胞中脂滴的拉曼譜圖(圖源:[1])
注:(a)有序狀態的脂質拉曼圖(IOL);(b)IC=C/IC=O比率的空間分布;(c)多變量分析得出的指紋區域中的光譜成分;(d)IC=C/IC=O比率分布的直方圖 。
此項研究使用顯微拉曼光譜成像技術來揭示了冷凍過程中卵母細胞內LD的脂質相分離現象 。 并使用甘油和丙二醇作為冷凍保護劑進行卵母細胞冷凍實驗 , 實驗結果證實脂質在LD內按照不同脂質不飽和度進行分布 , 研究數據還表明 , 飽和脂質可能在LD表面發生LPT , 而不飽和脂質是在LD核心處保持著無序的液相狀態 。
在許多哺乳動物中 , LD會影響細胞活性 , 細胞內脂質的增加量是胚胎冷凍保存成功的主要限制 。 盡管幾十年來已經研究了高脂質含量的卵母細胞和植入前胚胎的冷凍保存問題 , 但富含脂質的卵母細胞和胚胎的冷凍損傷研究仍然很少 。 在溫度升高到LPT開始以后的脂質重新分布對細胞的作用仍不清楚 。 在有序相熔化后 , LD內的大多數脂質很有可能都混合到均勻的混合物中 。 然而 , 冷凍后混合脂質所需的時間是未知的 , 需要更多的研究來揭示脂質再分布的不同方面及其對冷凍保存后細胞存活和發育的影響 。 脂質再分配的作用可以在細胞解凍后立即在細胞存活和脂質代謝中發揮重要作用 。 拉曼光譜似乎是研究生物細胞中LPT的一種前瞻性方法 , 可提供有關微米級脂質分布的信息 。 此項研究證明拉曼為研究與LD相關的低溫損傷機制以及制定減輕這些損傷的策略開辟了新的可能性 。
撰文|文競擇
排版|喬維鈞
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參考資料:
[1]MokrousovaVI,OkotrubKA,AmstislavskySY,etal.Ramanspectroscopyevidenceoflipidseparationindomesticcatoocytesduringfreezing.Cryobiology.2020Aug;95:177-182.doi:10.1016/j.cryobiol.2020.03.005.Epub2020Mar11.PMID:32171795.
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