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歡迎觀(guān)看本篇文章 , 小富來(lái)為大家解答以上問(wèn)題 。檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法有哪些,檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法介紹很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!
1、凱氏定氮法
2、凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮含量的方法 。即在催化劑的存在下,樣品中的有機(jī)氮用濃硫酸消化轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)銨鹽,然后銨鹽在堿性條件下轉(zhuǎn)化為氨 , 用水蒸氣蒸餾出來(lái),用過(guò)量的硼酸溶液吸收,再用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,計(jì)算出樣品中的氮含量 。
3、因?yàn)榈鞍踪|(zhì)中的氮含量是相對(duì)恒定的 , 所以可以從其氮含量計(jì)算出蛋白質(zhì)的含量,所以這種方法是一種經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法 。
4、縮二脲法
5、縮二脲法是一種用于鑒定蛋白質(zhì)的分析方法 。縮二脲試劑是一種堿性含銅試液,呈藍(lán)色,由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制而成 。
6、當(dāng)?shù)孜锖须逆I(多肽)時(shí),試液中的銅與多肽配位,絡(luò)合物呈紫色 。濃度可通過(guò)比色法分析,紫外-可見(jiàn)光譜中的波長(zhǎng)為540nm 。識(shí)別反應(yīng)的靈敏度為5-160毫克/毫升 。反應(yīng)蛋白單位為1-10毫克 。
7、苯酚試劑法
【檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法介紹 檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法有哪些】8、取6支試管,分別貼上標(biāo)簽 。前五個(gè)試管分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液 。最后一個(gè)試管加入待測(cè)蛋白溶液,沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液 。在室溫下放置30分鐘 。以第一個(gè)不含蛋白溶液的試管為空白對(duì)照,在650nm波長(zhǎng)處測(cè)量每個(gè)試管中溶液的吸光度 。
9、紫外線(xiàn)吸收法
10、大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm波長(zhǎng)處具有特征性的最大吸收,這是由于蛋白質(zhì)中存在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸 。可用于測(cè)定0.1 ~ 0.5 mg/ml蛋白質(zhì)溶液的含量 。
11、取9支試管,分別貼上標(biāo)簽 。前8個(gè)試管分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液,第一個(gè)試管不加入標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液,最后一個(gè)試管加入待測(cè)蛋白溶液,不加入標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液 。每個(gè)試管中的液體總量是通過(guò)加入蒸餾水來(lái)彌補(bǔ)而保持一致的 。將液體混合均勻,在280nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色分析 , 記錄吸光度值 。
12、科斯亮藍(lán)法
13、考馬斯亮藍(lán)顯色法的基本原理是蛋白質(zhì)能與考馬斯亮藍(lán)G-250定量結(jié)合 。考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合后,其可見(jiàn)光最大吸收峰從465nm變?yōu)?95nm 。
14、當(dāng)考馬斯亮藍(lán)G-250的濃度過(guò)量且恒定時(shí) , 當(dāng)溶液中蛋白質(zhì)的濃度不同時(shí),不同量的考馬斯亮藍(lán)G-250會(huì)從465nm的吸收峰形式變?yōu)?95nm的吸收峰形式 , 這種變化有一定的定量關(guān)系 。
15、一般來(lái)說(shuō),當(dāng)溶液中蛋白質(zhì)的濃度增加時(shí),顯色溶液在595nm處的吸光度基本上可以線(xiàn)性增加 。因此,考馬斯亮藍(lán)G-250顯色法可用于測(cè)定溶液中蛋白質(zhì)的含量 。
本文到此結(jié)束,希望對(duì)大家有所幫助 。
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