sgRNA|在iPS中利用CRISPRi系統發現病毒感染新機制——NEPA21高效基因轉染系統助力( 二 )


最后 , 該研究團隊檢測了 TMRPSS2 和 CTSB 的雙重敲降機制對于 ACE2 iPS 的 SARS-CoV-2 感染的影響作用 。 結果發現 , 感染的 CTSB 和 TMPRSS2 雙基因敲降細胞中的病毒 RNA 拷貝數低于感染的單基因敲降細胞中的病毒 RNA 拷貝數 , 如下圖所示 。
sgRNA|在iPS中利用CRISPRi系統發現病毒感染新機制——NEPA21高效基因轉染系統助力
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CRISPR/Cas9基因編輯系統可以使用轉錄阻遏物結構域(KRAB)和短引導RNA(sgRNA)融合的降解蛋白Cas9(dCas9)選擇性地抑制靶基因的表達 。 CRISPRi和iPS的組合可以將靶基因的表達抑制到1%或更低 。 此外 , 在由iPS誘導的體細胞中 , 該表達也保持低水平 。 到目前為止 , 利用iPS衍生的體細胞進行的SARS-CoV-2研究已得到廣泛開展 。
值得一提的是 , 為了進行CRISPRi實驗 , 該研究團隊使用來自NEPA GENE的NEPA21高效基因轉染系統 , 并最終獲得了成功理想的實驗結果 。
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NEPA21高效基因轉染系統采用獨特設計的電轉程序 , 可應用細胞、離體組織或動物活體的轉染 。 配合獨有的電壓衰減(Voltage/Decay)設計 , 可在獲得高轉染效率的同時 , 提高細胞存活率 。 專門針對難轉染的原代免疫細胞、干細胞、神經細胞、活體動物、受精卵及宮內胚胎等轉染 。 目前已有眾多應用文獻發表在高水平學術期刊 , 是基因編輯、細胞免疫等前沿生物研究中的首選品牌!
特點
1:采用全新設計的電轉程序 , 電壓衰減(Voltage Decay)模式;基因導入+反向導入模式;
2:不需要特殊轉染試劑輔助 , 節省實驗成本;
3:電轉程序中的各項參數實時可見、可調 , 特別適用于優化原代細胞、非常見細胞的電轉參數 。
常用配件
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參考文獻
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