經驗分享：納米抗體技術應用的最新進展( 三 ) _健康小知識

2010年在中國首次報道的蜱傳病毒發熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒(severefeverwiththrombocytopeniasyndromevirus,SFTSV)可導致人患發熱伴血小板減少綜合征(severefeverwiththrombocytopeniasyndrome,SFTS) 。吳喜林等[47]通過篩選SFTS獲得特異性結合SFTSV表面糖蛋白(glycoprotein,GN)的納米抗體VHH ，鑒定CDR序列并構建了人源化的VHH-HUFC1(SNB抗體) ，通過試驗表明SNB抗體可應用于SFTSV的檢測試劑盒的研發，即納米抗體雙抗體夾心ELISA檢測sGN蛋白從而檢出SFTSV病毒，其中SNB01與SNB37的雙抗組合檢測SFTSV真病毒的靈敏度為3.75×106gc/mL 。
2.3疾病診斷工具
準確的疾病診斷是指導臨床治療的關鍵步驟，納米抗體成像技術及疾病診斷研究需要較高的準確度和靈敏度，不斷地應用創新使得Nbs成為疾病診斷的理想選擇。 Nb擁有體積小、易滲透、快速腎臟清除的優勢，可用放射性核素[17]、熒光探針、酶示蹤劑、生物素或不同的藥物等[48]分子進行標記，與分子成像技術相結合從而優化成像系統，因此Nbs作為良好的示蹤劑，成為了體外和體內成像的理想選擇。正電子發射斷層掃描(positronemissioncomputedtomography,PET)和單光子發射計算機化斷層顯像(single-photonemissioncomputedtomography,SPECT)[49-50]中，可分別用正電子發射核素(如18F、68Ga或89Zr)和γ-發射核素(如99mTc等)標記Nbs進行成像；在超聲成像中，可使用Nbs提高造影劑(如微泡和納米泡[18])的穿透力強及信號，主要用于可視化血管系統[51]；特別是在腫瘤診斷領域應用廣泛，檢測癌細胞本身、生物標志物、可視化與癌細胞周圍環境密切相關的成分成為診斷和監測的有效策略，有研究表明[52]在原位臨床前模型中，抗HER2的Nbs2Rs15d成功地檢測到HER2陽性的腦病變，除此之外，表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)、前列腺特異性膜抗原(prostatespecificmembraneantigen,PSMA)、CD20和CD38[50]等也被作為癌細胞成像的目標抗原展開研究；巨噬細胞被認為是許多免疫療法失敗的元兇，巨噬細胞甘露糖受體蛋白(MMR,CD206)在促腫瘤的巨噬細胞上高度表達， 99mTc標記的抗MMRNbs可用于SPECT/CT對小鼠乳腺癌和肺腺癌的可視化[53]；抗血管細胞粘附分子-1(vasculaturecelladhesionmolecule-1,VCAM-1)的Nbs已被用于標記微泡，并應用于腫瘤血管的可視化超聲成像，對小鼠注射10min后腫瘤內可見超聲造影信號持續，且信號明顯高于對照。此外，還用于炎癥性疾病及中樞神經系統等疾病的成像，為了以高靈敏度監測動脈粥樣硬化病變， Bridoux等[54]使用了一種基于Nb的示蹤劑(cAbVCAM1-5)靶向血管細胞粘附分子-1(VCAM-1) ，將RESCA螯合劑偶聯到cAbVCAM1-5Nb上，并用[18F]AlF進行標記，通過PET/CT可視化載脂蛋白e基因缺陷小鼠動脈粥樣硬化斑塊。對于光學成像， Nbs被熒光染料標記，并通過非侵入性的體內成像方式、體內顯微鏡和體外流式細胞儀進行檢測[15,55] 。在結直腸癌(colorectalcancer,CRC)早期初篩以及輔助診斷方面， Nb作為親和試劑來開發糞便免疫化學檢測(fecalimmunochemicaltests,FITs)用于檢測人類糞便樣品中的血紅蛋白(hHg)顯示出優異的再現性和精確度，可作為早期結直腸癌的大規模群體篩查工具[56] ，這克服了結腸鏡檢查前的飲食限制及檢查時的侵入性，提高了患者的可接受度。這些技術有助于我們探究疾病的發生過程及了解發病機制，在早期捕獲較高的病變信號，進行無損傷實時成像，方便疾病的預后觀察，在內窺鏡檢查過程中或在熒光引導的手術背景下用于可視化表面病變。
2.4疾病治療
2.4.1靶向腫瘤治療
Nb在中樞神經系統疾病、循環系統疾病、感染性疾病、腫瘤學和炎癥性疾病中均表現出優異的應用價值和前景(表2) ，主要聚焦于腫瘤治療且已經取得了顯著成效，納米抗體-藥物偶聯[18]、CAR-T[57-58]、光動力療法(PDT)[59]、靶向放射性核素治療等治療方法的不斷研發改進為患者帶來了新的希望。