特立帕肽注射液人體等效性研究現狀分析及相關考慮( 二 ) _健康小知識

1、研究類型
根據特立帕肽作為結構簡單的小分子多肽具有的半衰期短和免疫原性低的特點（穩態濃度下， 20μg ，每日給藥一次），建議采用隨機、交叉對照、單次給藥的試驗設計，洗脫期通常不少于24小時，一般可設計為1~2天。
歐洲藥品管理局（EMA）已上市的特立帕肽生物類似藥（livogiva）的公共審評報告[5]當中， PK研究部分Cmax和AUC各自的個體內變異系數如下所示：

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如圖所示， Cmax和AUC各自的個體內變異系數均未超過30% ，因此認為該品種無個體內高變異的特征，故PK等效研究推薦在健康男性或女性志愿者中進行一項隨機、開放、兩制劑、兩周期、雙交叉的試驗。
2、采血點和洗脫期設計
根據原研FDA說明書[6]可知，特立帕肽在皮下注射后被吸收，皮下注射20μg劑量后在大約30分鐘后達到峰值血清濃度， 3小時內降至不可量化的濃度。通過皮下注射給藥時，血清中特立帕肽的半衰期約為1小時。原研資料以及文獻研究中特立帕肽的藥代動力學參數如下：

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根據上述PK參數，生物等效研究采血點設計時需關注達峰時間范圍以及半衰期，科學地設計采血點以滿足生物等效性研究的需要。根據原研相關資料和文獻數據，特立帕肽的Tmax中位值集中在0.1667~0.5h（10~30min），極值范圍為0.083（5min）-3.50h ，因此可在該達峰范圍內科學的設計采血點；特立帕肽半衰期的極大值約為1.4h ，根據相關文獻，血藥濃度最后可測的點為2.58±0.707h[10] ，故采血終點可設為5h ，以滿足法規對于采血終點不短于3個末端消除半衰期的要求。
3、劑量及給藥途徑
選擇的給藥劑量應能敏感地分辨候選藥和參照藥PK特征差異。指導原則推薦的給藥劑量為20μg ，通過皮下注射途徑進行注射給藥，選擇統一的注射部位。根據說明書規定的臨床給藥方式，在腹部或大腿進行注射， BE研究中可考慮腹部。給藥過程的標準化管理是BE研究的關鍵。
4、樣本量設計
據指導原則推薦，試驗前需充分估計所需的樣本量，通常α取雙側0.1（雙單側0.05），檢驗效能為80% 。樣本量估算時應充分考慮個體內變異和原研藥既往信息藥代參數變異情況等。根據法規要求，計算正式試驗樣本量列表如下：

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參考CDE備案信息，所有登記臨床試驗的企業空腹試驗均采用兩周期、兩序列交叉設計，樣本量為28~76例不等，提示本品PK等效試驗樣本量與兩制劑間差異以及個體內變異相關。預試驗可以為正式試驗的例數提供較為可靠的參考，建議申辦方根據不低于80%的檢驗功效并預設較為保守的GMR進行正式試驗樣本量的估算和確定。
5、檢測物質及難度
該品種生物等效評估基于血漿中特立帕肽的濃度，在推薦的給藥劑量20μg下，血漿中特立帕特的Cmax的均值范圍為78.21~227pg/mL ，根據相關文獻[9-10]研究，生物分析檢測的定量下限需達到6-10pg/mL左右的水平才可以較為準確的定量特立帕肽的血藥濃度，同時藥物在血漿中穩定性不佳，因此本品種生物分析對方法學的靈敏度和特異性要求較高，推薦在試驗開展之前對分析方法學進行充分的驗證。
6、生物等效性評價
PK比對研究主要終點指標的選擇是等效性評價的關鍵。根據口服固體制劑的相關指導原則， AUC0-∞和Cmax是判斷生物等效性的主要參數，因此推薦AUC0-∞和Cmax作為主要終點指標， AUC0-t、tmax、Vd和t1/2作為次要研究終點重點進行比較分析，等效性界值設定為80.00%-125.00% 。