同樣 ， 氰基處的羥基化為酰胺和羧酸代謝物在成熟葉片中也表現出最高的M/P比 ， 分別約為2.1%和0.6% 。 花朵中僅存在微量的IN-JCZ38 ， 而這些羥基化代謝物在任何發育階段的果實中均未檢測到 。

總的來說 ， 從這項研究中獲得的結果表明 ， 氰蟲酰胺對植物代謝相對頑固 。 在實驗過程中 ， 氰蟲酰胺是不同組織中的主要殘留物 ， 直至果實成熟 。 生物轉化過程主要發生在地上生物質中 ， 特別是在成熟葉中 。
氰蟲酰胺→IN-J9Z38→IN-MLA84→TP619是氰蟲酰胺在番茄植株中的主要轉化途徑 ， 從它們在處理后不同時間普遍存在于葉子、花和果實中可見 。 此外 ， 番茄植株中氰蟲酰胺的生物轉化也與幾種代謝物有關 ， 包括低豐度的I期 ， II期和其他分解產物 。 據我們所知 ， 這項研究首次捕捉到了二酰胺殺蟲劑在作物植物生命周期中的代謝命運 。
植物生長和殺蟲劑應用番茄植株在發芽后約四周通過土壤浸泡用氰蟲酰胺處理一次 ， 使用溫室種植植物推薦的低施用率 。 處理組的每個鍋接受470mL稀釋溶液 。 對照組接受相同量的水 。 每組由40株植物組成 ， 這些植物在溫室長凳上以完全隨機的設計排列 。

每天晚上在早晨采樣之前 ， 植物都要澆水 ， 以增加根系壓力 。 日出后一到三個小時 ， 用鋒利的剃刀將植物放在土壤表面以上約7厘米處 ， 以產生平坦的樹樁表面 ， 木質部汁液在上面積聚成液滴 。 為了盡量減少污染 ， 丟棄在除頂的前2分鐘內積累的液滴 ， 并用去離子水洗滌殘肢并用紙巾輕輕吸干 。 在接下來的 20 分鐘內 ， 將汁液頻繁移液到保存在冰上的 2.0 mL 離心管中 。 然后將試管儲存在-80°C直至分析 。

氰蟲酰胺定量和代謝物篩選氰蟲酰胺的回收率和潛在的植物基質干擾通過內標d的比例測定最終提取物中的氰蟲酰胺濃度與每個樣品中的標稱加標濃度 。 我們的初步試驗表明 ， 傳統的QuEChERS基質去除程序導致一些氰蟲酰胺代謝物的顯著損失 。 因此 ， 在本研究中 ， 僅使用C18吸附劑部分去除基質以基本保留代謝物庫 。

結論如前所述進行氰蟲酰胺代謝物的篩選簡而言之 ， MS1掃描數據由化合物發現者軟件使用定制設計的工作流程進行處理 ， 未處理樣品中存在的m / z信號從氰蟲酰胺代謝物篩選中消除 。 假設代謝物含有至少一個來自母體氰蟲酰胺的Cl和/或Br原子 ， 則通過Cl / Br同位素過濾器進一步處理候選代謝物 。

隨后 ， 使用化合物發現者鑒定的代謝物的準確m / z和相應的MS將其與編譯的代謝物列表進行搜索碎片離子 。 其余代謝物被注釋為新鑒定的轉化產物 。 由于缺乏參考標準品 ， 初步確定的代謝物的相對定量 。 并提供了定量水平的氰蟲酰胺和代謝物的色譜圖 。

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