經驗分享：基因治療在眼科疾病研究中的應用及常見注射方式簡介( 二 ) _健康小知識

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圖2前房注射
2.玻璃體腔注射
?實驗前準備
麻醉小鼠：在小鼠稱重后，經腹腔注射適量的1%戊巴bi妥鈉溶液，放置于飼養籠內，等待麻醉約5-10min 。小鼠麻倒后，眼球表面滴入擴瞳劑使其散瞳。
?玻璃體腔注射
用微量注射器吸取適量病毒備用，取麻醉后的小鼠置于操作臺上，眼部給予鹽酸利多卡因進行局部麻醉，左手按住頭部，使其眼球部分突出，右手持微量注射器自角膜后緣1mm位置插入玻璃體腔內，針尖先垂直進入，隨后傾斜，慢慢推注病毒。病毒注射完畢，緩慢抽出針頭。
?動物復蘇
將小鼠放回飼養籠內，注意保溫，待其蘇醒。

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圖3玻璃體注射
3.視網膜下注射
小鼠的后半眼球壁由內向外分為視網膜、脈絡膜和鞏膜。小鼠視網膜結構與人體類似（圖4），注射具體操作步驟如下：

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圖4C57BL小鼠視網膜組織HE染色圖（400×）
?實驗前準備
麻醉小鼠：在小鼠稱重后，經腹腔注射適量的1%戊巴bi妥鈉溶液，放置于飼養籠內，等待麻醉約5-10min 。小鼠麻倒后，眼球表面滴入擴瞳劑使其散瞳。
?病毒注射
用微量注射器吸取適量病毒備用，取麻醉后的小鼠置于操作臺上，眼部給予鹽酸利多卡因進行局部麻醉，左手按住頭部，使其眼球部分突出，右手持微量注射器自角膜后緣1mm位置插入玻璃體腔，針尖先垂直進入，隨后傾斜，直至對側視網膜（經玻璃體腔注射），有阻力時停止進針，慢慢推注病毒。或者用注射器針頭與眼軸呈15°角在動物暴露出的距角膜緣1-2mm處鞏膜開一個扎破鞏膜但不穿透RPE的通道，針頭斜面沒入即停止進針（經鞏膜注射），慢慢推注病毒。病毒注射完畢，緩慢抽出針頭。
?動物復蘇
將小鼠放回飼養籠內，注意保溫，待其蘇醒。

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4.結膜下注射
結膜下注射是眼局部給藥的常用方法。具體操作步驟如下
?實驗前準備
麻醉小鼠，等待約5-10min ，滴入擴瞳劑。
?病毒注射
用微量注射器吸取適量病毒備用，取麻醉后的小鼠置于操作臺上，眼部給予鹽酸利多卡因進行局部麻醉，用鑷子夾起結膜，沿結膜內側刺入3-4mm ，可透過結膜觀察到針頭的走向，慢慢注射病毒，注射完畢，停留數秒拔針，注射后可見球結膜下有隆起，眼球突出。
?動物復蘇
將小鼠放回飼養籠內，注意保溫，待其蘇醒。

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圖6結膜下注射
來源賽業生物
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