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乙肝新型反義寡核酸和三種優化后ASOs正在臨床前

健康知識養生常識

HBV-反義寡核苷酸（ASO）當前全球只有兩家在研制中 ， 分別是葛蘭素史克和臨床階段生物制藥公司（AligosTherapeutics） 。 雖然 ， 今年三月末Aligos已宣布終止乙肝病毒反義寡核酸ALG-020572（1期多次報告ALT突然升高 ， 提示肝毒性） ， 該公司繼續在動物實驗中 ， 探索HBVASOs分子 。
乙肝新型反義寡核酸和三種優化后ASOs正在臨床前
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乙肝新型反義寡核酸 ， 通過AAV-HBV模型 ， 驗證三種結構新穎ASOs
在2022年歐肝會上（EASL2022） ， 研究人員發表了一項題為：結合新型ASO化學物質后 ， 顯著提高了AAV-HBV小鼠模型中HBVASOs的效力和持久性 。 應用專有化學方法開發了同類最佳的HBVASOs ， 即ALG-020572和ALG-020576 ， 它們都具有獨特的N-乙酰半乳糖胺4(GalNac4)偶聯物 。
這些ASOs ， 分別針對小HBsAg和HBx蛋白的開放閱讀框 。 這兩種ASOs均含有下一代螺環丙基橋接核酸(scpBNA)和核堿基修飾單體 ， 可降低肝毒性 ， 同時在AAV-HBV小鼠模型中保持療效 。
在這項研究中 ， 研究人員進一步探索了ALG-020572和ALG-020576序列中的其他BNAs ， 例如胍橋核酸(GuNA)和其他專有的BNAs ， 并進一步證明了它們可以在體外和體內改善并提高活性 。 實驗方法如下：
研究人員在MerMade12與MerMade48合成器上合成了具有LNA和第三代BNA化學成分的ASOs 。 采用HBsAg釋放法 ， 在HepG2.2.15細胞或HBV感染原代人肝細胞（PHH）中進行體外篩選ASOs 。 使用AAV-HBV小鼠模型 ， 通過分析小鼠的血漿HBsAg和ALT以測試GalNAc-ASOs的療效和對肝臟的毒性 。
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結果表明 ， 發現階段的ALG-021682和ALG-021639是和ALG-020572定位相同位點的GalNAc4偶聯ASOs 。 ALG-021682包含GuNA ， 而ALG-021639包含一個新型第三代BNA 。 在HepG2.2.15實驗中 ， 未偶聯的ALG-021682的EC50比未偶聯的ALG-020572低5倍 。
在HBV感染PHH中 ， 未綴合的ALG-021639比未綴合的ALG-020572效力高5倍 。 在AAV-HBV小鼠模型中 ， 在單次皮下給藥5mg/kgALG-021682和ALG-021639時 ， 實現的乙肝表面抗原最低值要比ALG-020572類似物還低2倍 。 沒有一個ASO ， 顯示ALT升高 。
最后 ， 發現階段的ALG-021618是ALG-020576衍生的一種結構新穎ASO 。 由于無法被HepG2.2.15細胞代謝處理 ， 它在體外是無活性的 。 然而 ， 在第0天、第3天和第7天重復給藥3X10mg/kg的AAV-HBV小鼠模型中 ， ALG-021618實現的HBsAg最低值為-1.8log10IU/mlvs.ALG-020576-1.2log10IU/ml 。 第60天 ， 以ALG-020576給藥的動物的HBsAg恢復到基線水平 ， 但以ALG-021618給藥的動物 ， 仍將HBsAg抑制1log10IU/ml 。
綜上所述 ， 研究人員給出結論是：GuNA和其他新型BNAs ， 改善了先導ASOALG-020572的體外和體內活性 。 經過新修飾后的ALG-020576 ， 顯著提高了對HBsAg敲低的體內深度和持久性 。 結合這些化學物質的進一步研究正在進行中 。
乙肝新型反義寡核酸和三種優化后ASOs正在臨床前
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小番健康結語：隨著GSK836第2期中期積極數據公布 ， 我們都想更多地了解反義寡核酸（ASO） 。 Aligos是全球另一家正在深入研究這一領域的制藥公司 ， 本研究想要介紹的進展其實很簡單 ， 即雖然HBV-ASOs-ALG-020572因對肝臟毒性在1期終止了 ， 但在572的基礎上 ， 繼續在動物實驗中探索更多新型ASOs分子 ， 比如本研究中的ALG-021682、ALG-021639和ALG-021618；
【乙肝新型反義寡核酸和三種優化后ASOs正在臨床前】它們在AAV-HBV小鼠模型實驗中顯示 ， 在抗病毒效力方向 ， 特別是對乙肝表面抗原調降作用方面明顯高于已經終止的ALG-020572 。 同時 ， 以上三種早期階段的反義寡核苷酸 ， 也沒有一種導致轉氨酶升高 ， 即未見肝毒性 。 而ALG-021682與ALG-021639是基于ALG-020572基礎上研發的 ， ALG-021618是基于ALG-020576基礎上開發的反義寡核酸 。