CD：肺癌為何會對一代又一代的EGFR-TKI耐藥？這個研究破案了！ _健康小知識

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全球每年約有220萬人罹患肺癌， 180萬人死于肺癌[1] ，肺癌嚴重威脅人類生命健康。 EGFR突變是最常見的肺癌突變類型，尤其在包括中國在內的亞洲地區。
自2002年問世以來，針對EGFR突變的酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI），大大延長了肺癌患者的生存時間，已成為EGFR突變肺癌一線治療的最佳選擇。
可是，道高一尺，魔高一丈。 EGFR-TKI應用一段時間后，患者不可避免地出現耐藥，成為制約肺癌靶向治療的一個難點[2] 。為克服耐藥， EGFR-TKI不斷更新換代， “打補丁”式地進行完善，從以吉非替尼為代表的一代，到以奧希替尼為代表的三代，再到臨床試驗中的四代，一代更比一代強，然而，耐藥依舊層出不窮。
治療過程中產生新突變，是肺癌獲得性耐藥的一個重要原因[3] 。如對一代和二代TKI耐藥的T790M突變，對三代TKI耐藥的C797S突變。但是，其詳細機制尚有待闡明。
近日，由以色列魏茨曼科學研究所YosefYarden領銜的研究團隊，揭示了肺癌經EGFR-TKI治療產生耐藥突變的機制，相關論文發表于腫瘤學頂級期刊CancerDiscovery上[4] 。
他們發現，肺癌細胞經EGFR-TKI刺激后， AXL被激活。 AXL一方面激活RAD18 ，啟動DNA易錯旁路修復機制，加速耐藥突變的出現；另一方面激活MYC ，調控嘌呤合成，使核苷酸庫失衡，增強誘變。如果在EGFR-TKI的治療中聯用抗AXL抗體，能抑制耐藥性的產生，防止肺癌復發。

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官網論文首頁截圖
研究伊始，研究人員使用EGFR-TKI處理肺癌細胞，獲得不同程度的耐藥亞克隆細胞，對這些細胞進行轉錄組測序，發現GAS6是持久耐藥細胞中最明顯的高表達基因。與此同時，來自臨床的樣本也發現， EGFR-TKI治療失敗的肺癌患者也高表達GAS6 。
既往研究發現， GAS6及其受體AXL在癌癥中參與了腫瘤細胞的增殖和轉移[5] 。研究人員對AXL在肺癌中的表達進行檢測，發現TKI治療后復發的肺癌小鼠AXL表達升高， AXL磷酸化水平也上調。這提示GAS6-AXL軸可能還參與肺癌的TKI耐藥。
為了檢驗假說，研究人員分別過表達和敲除肺癌細胞的AXL ，然后把細胞暴露于EGFR-TKI 。相比于野生型的肺癌細胞， AXL過表達細胞存活率增加，而AXL敲除細胞存活率降低。
接著，研究人員又在體內對AXL的促耐藥作用進行了驗證，把AXL過表達肺癌細胞和AXL敲除細胞分別接種于裸鼠，然后用TKI治療荷瘤小鼠。 AXL過表達的肺癌小鼠更早地出現耐藥， AXL敲除的肺癌小鼠則完全沒有復發現象。
這些結果表明， GAS6-AXL軸被TKI治療激活后，促進了肺癌細胞耐藥。

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AXL過表達的肺癌小鼠生長加快， AXL敲除的肺癌小鼠腫瘤生長減慢
我們都知道， DNA損傷是對細胞的致命打擊，為應對DNA損傷，細胞會啟動DNA修復機制。 TLS聚合酶參與DNA損傷修復，直接在損傷的DNA上摻入核苷酸，延續DNA復制。而TKI的作用機制之一即是破壞細胞對DNA損傷的修復能力[6] 。
于是，研究人員檢測了TKI治療后肺癌細胞的DNA損傷和修復情況。
經TKI處理后，肺癌細胞DNA雙鏈斷裂，產生ROS ，凋亡增加，存活下降， RAD18和TLS聚合酶等DNA修復相關酶表達上調。而在AXL過表達后，肺癌細胞能抵抗TKI的打擊， DNA斷裂減少， ROS水平降低，凋亡被抑制，存活率升高， RAD18和TLS聚合酶的表達上調至更高水平。
RAD18是一種E3泛素連接酶，通過誘導PCNA單泛素化和招募TLS聚合酶來激活DNA的易錯旁路修復[7] 。易錯旁路途徑雖然能提高細胞對DNA損傷的耐受性，但卻犧牲了復制的保真度，它在損傷的DNA模板對側摻入錯誤的核苷酸，引發基因組突變。