CIR：靶向腫瘤相關巨噬細胞的CAR-T療法誕生，或能治療多種癌癥！ _健康小知識

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當下，免疫療法正在腫瘤治療領域掀起一場革命，但是仍有眾多患者對免疫療法沒有良好應答。腫瘤相關巨噬細胞（TAM）是導致治療抵抗的重要原因[1] 。
TAM是腫瘤微環境（TME）中含量最豐富的免疫細胞，并且腫瘤中的TAM通常具有促進腫瘤發生發展的作用[2] 。因此，清除TAM或許是一種能夠改變TME免疫抑制性環境，促進抗腫瘤免疫應答的方法。但是前期開發的CSF1/CSF1R軸抑制劑在臨床上效果不佳[3] ，這提示我們仍要尋找更好的治療策略。
近期，由西奈山伊坎醫學院BrianD.Brown和MiriamMerad領銜的研究團隊，在《癌癥免疫學研究》雜志發表研究成果[4] 。他們發現，靶向F4/80的CAR-T不僅可以有效地清除TAM ，解除TAM引起的免疫抑制，還可以增強腫瘤抗原特異性T細胞免疫應答，從而抑制多種腫瘤的生長。

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論文首頁截圖
研究團隊首先設計了靶向巨噬細胞表面特異性標志物——F4/80的CAR-T細胞（F4.CAR-T），隨后將其與小鼠巨噬細胞或中性粒細胞共孵育，檢測CAR-T對巨噬細胞的特異性殺傷能力。
結果表明， F4.CAR-T能夠十分特異地殺傷巨噬細胞而不損傷中性粒細胞。接下來，他們在小鼠體內測試了F4.CAR-T對巨噬細胞的殺傷能力以及安全性，轉輸了F4.CAR-T的小鼠沒有表現出應激或者治療死亡案例，并且在轉輸CAR-T細胞12天后，小鼠脾臟中巨噬細胞的數量減少了80% 。
這些數據表明， F4.CAR-T能夠有效并且特異性地殺傷巨噬細胞。

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F4.CAR-T可以有效地殺傷巨噬細胞
那么F4.CAR-T能否浸潤至腫瘤中并清除TAM呢？
為了回答這個問題，研究團隊構建了HKP1非小細胞肺癌小鼠模型，隨后為小鼠轉輸了F4.CAR-T細胞，通過免疫熒光以及流式細胞術，他們發現，腫瘤內部浸潤了大量的F4.CAR-T細胞，并伴隨著TAM數量的顯著減少。
這些數據表明， F4.CAR-T細胞能夠有效浸潤至腫瘤內部并殺傷TAM 。

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F4.CAR-T能夠浸潤至腫瘤內部殺傷TAM
F4.CAR-T能夠減少TAM的數量，那么這可以減緩腫瘤進展嗎？
研究團隊觀察了轉輸F4.CAR-T細胞的荷瘤小鼠的腫瘤負荷以及荷瘤生存期，發現與轉輸對照T細胞的小鼠相比，轉輸F4.CAR-T細胞的小鼠腫瘤體積更小，并且荷瘤生存期顯著延長。
這些數據表明，轉輸F4.CAR-T細胞能夠顯著延緩腫瘤進展，延長小鼠的荷瘤生存期。

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轉輸F4.CAR-T顯著抑制腫瘤生長并延長生存期
在免疫熒光檢查小鼠腫瘤組織時，研究團隊注意到治療組小鼠腫瘤細胞中熒光標志物tdTomato的表達水平有明顯的下降。考慮到曾有研究表明，熒光蛋白GFP也可以作為一種腫瘤特異性抗原被荷瘤小鼠T細胞檢測到，并且GFP的表達水平與MHC表達水平呈負相關關系[5] 。他們猜想， tdTomato或許也能代表一種腫瘤特異性抗原，它的表達下降可能與MHC表達水平上升有關，進而使腫瘤更容易被免疫系統殺傷。
為了驗證這個猜想，研究團隊分析了腫瘤細胞上tdTomato熒光強度與MHC表達水平，發現相比于未轉輸F4.CAR-T的小鼠，轉輸F4.CAR-T細胞的小鼠其腫瘤細胞tdTomato熒光強度顯著降低，但是MHCⅠ和MHCⅡ的表達顯著上調。
腫瘤細胞中tdTomato的減少和MHC表達的增加與腫瘤負荷的降低相關，提示F4.CAR-T治療可能促進內源性T細胞對tdTomato+腫瘤細胞的免疫應答。