細胞|JITC：香港中文大學于君團隊發現胃癌免疫治療新靶點( 三 ) 基因|組織|生存率|患者|腫瘤

由于干擾素γ（IFNγ ）由活化的淋巴細胞分泌[4] ，因此，研究人員進一步檢測了腫瘤組織中IFNγ的表達水平。與YTN16-sgNC組腫瘤組織相比， YTHDF1基因敲除組腫瘤組織中的IFNγ顯著升高。有趣的是，通路富集分析顯示， YTN16細胞YTHDF1敲除后， IFNGR1是JAK-STAT信號通路中的上調最明顯的基因，并且在胃癌細胞株中發現， YTHDF1缺失使IFNGR1、JAK1、JAK2和STAT1蛋白表達上調。以上結果表明， YTHDF1基因敲除使IFNGR1上調進一步激活JAK-STAT1通路，從而增強腫瘤免疫監視。

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腫瘤細胞中YTHDF1的缺失激活了適應性抗腫瘤免疫
從上文可知，腫瘤細胞中敲降YTHDF1表達后可增強適應性T細胞抗腫瘤免疫，那么， YTHDF1表達情況對腫瘤內的免疫抑制細胞有何影響呢？
髓源性抑制細胞（MDSCs）是一種具有免疫抑制能力的腫瘤浸潤性免疫細胞，越來越多的證據表明， MDSCs的高浸潤性與不良預后和治療耐藥有關[5] 。于是，研究人員通過流式細胞術檢測了YTN16腫瘤組織中的MDSCs浸潤情況后發現，與YTN16-sgNC組腫瘤組織相比， YTHDF1基因敲除組腫瘤組織和浸潤性免疫細胞中的MDSCs比例更低。
適應性抗腫瘤免疫主要依賴于樹突狀細胞（DC）， DC將腫瘤細胞的抗原呈遞給T淋巴細胞，前面結果已證實，腫瘤細胞敲降YTHDF1表達后可促進適應性T淋巴細胞的浸潤。那么， YTHDF1敲降后是否也會增加DC浸潤呢？
于是研究人員也觀察了C57BL/6小鼠腫瘤組織中DC的浸潤情。結果顯示， YTHDF1基因敲除組腫瘤組織中浸潤性DC的比例明顯高于YTN16-sgNC組，且DC表面組織相容性復合體II類分子（MHCII）表達增高， MHCII表達是DC細胞成熟的基本特征，而成熟的DC可分泌白細胞介素-12（IL-12）以增強適應性抗腫瘤免疫。隨后，研究發現， YTHDF1基因敲除組腫瘤組織中IL-12明顯高于YTN16-sgNC組。此外，在TCGA隊列中， DC腫瘤浸潤與YTHDF1 mRNA表達呈負相關。

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腫瘤細胞中YTHDF1缺失可招募成熟樹突狀細胞
以上這些結果表明，腫瘤細胞中YTHDF1缺失可誘導成熟DC的募集，從而促進CD4+T細胞和CD8+T細胞的浸潤，并增加細胞毒性細胞因子IL-12的分泌。
研究團隊為了進一步評估腫瘤組織中YTHDF1的表達是否會影響全身抗腫瘤免疫應答，他們在同一小鼠身上接種了YTN16-sgNC細胞和敲降YTHDF1表達的穩轉細胞YTN16-sgYTHDF1-1 。隨后根據接種情況不同，研究人員將小鼠分成了3組，分別是YTN16-sgNC組、YTN16-sgYTHDF1-1組和混合組。在YTN16-sgNC和YTN16-sgYTHDF1-1組中，都是將同一細胞分別接種到小鼠的兩側。而在在混合組中，則是將YTN16-sgNC和YTN16-sgYTHDF1-1細胞分別接種到同一小鼠的左側和右側。
結果顯示，接種8周后， YTN16-sgNC組有腫瘤生長， YTN16-sgYTHDF1-1組無腫瘤生長；而混合組小鼠兩側均有腫瘤生長，但右側腫瘤體積明顯小于左側，蛋白印跡實驗證實了sgYTHDF1-1腫瘤保留了YTHDF1蛋白的丟失。這表明， YTN16-sgNC腫瘤可能導致抗腫瘤免疫的系統性抑制，反過來又允許YTN16-sgYTHDF1-1腫瘤存活。

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3組小鼠接種后，腫瘤體積變化情況
既然YTHDF1缺失可消除具有免疫活性宿主中的腫瘤，那么接下來研究人員猜想它是否能觸發持久的全身性抗腫瘤免疫反應，從而阻止未來的腫瘤植入？于是他們將小鼠分為兩組，分別將YTN16-sgNC細胞和YTN16-sgYTHDF1-1細胞接種到小鼠的右背側，接種2周后，切除右背側腫瘤，然后將YTN16-sgNC細胞注射到左側。結果顯示，之前接種YTN16-sgNC細胞組小鼠左側有腫瘤生長，之前接種YTN16-sgYTHDF1-1細胞組未見腫瘤生長。這些結果表明，接種YTN16-sgYTHDF1-1細胞后的小鼠，可充分觸發宿主的抗腫瘤免疫，從而阻止隨后接種表達正常YTHDF1細胞的腫瘤植入。