1. 首頁 > 生活雜燴 > 健康養生 > >

病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法


病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法
文章圖片
1. 背景介紹
心臟中的細胞主要包括心肌細胞和心臟成纖維細胞兩大類 。 其中 ， 心肌細胞又分為工作細胞和自律細胞 。 工作細胞指的是可在外來刺激下產生興奮的細胞 ， 包括心室肌細胞和心房肌細胞 。 而自律細胞指的是那些沒有穩定靜息電位的細胞 ， 可自動產生節律性的興奮 ， 主要包括P細胞（又稱起搏細胞）和浦肯野細胞 。 由于左心室的心肌壁較厚 ， 所以在AAV的注射中 ， 通常靶向左心室壁進行注射 。
維真生物AAV在心臟研究中的應用及注射方法

病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法
文章圖片

【病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法】(圖片來源：External Structure Of Human Heart Anatomy | MedicineBTG.com)
2. 注射方法、注射量和啟動子的選擇 AAV在心臟中的注射方式有多種 ， 通常文獻報道較多的是心肌注射和尾靜脈注射 ， 均能通過在體注射感染心臟 ， 所需AAV總量在10E10-10E11vg 。 心肌注射對手術操作要求較高 ， 難度稍大 ， 多采用小量多點注射 ， 注射體積20μL/site ， 3-5點注射 。 尾靜脈注射則易于操作 ， 但是特異性較心肌注射稍弱 ， 注射體積在100μL左右 。

病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法
文章圖片
【維真生物】在心臟相關研究的腺相關病毒/AAV注射方法
AAV進行在體心臟研究中 ， AAV9和AAV8型對心臟的感染效率要優于其他血清型 ， 且以AAV9型的應用居多 。 要實現目的基因在心臟中特異性表達 ， 則推薦選擇心臟特異性的啟動子cTNT和αMHC 。
3. 文獻與案例分享 研究者通過構建體內獲得性耐藥的模型 ， 檢測到JOSD1基因在這一過程中上調最為明顯 ， 預示了其在耐藥中的重要作用 。 為進一步驗證JOSD1在婦科腫瘤中的功能作用 ， 研究者通過體外實驗 ， 在婦科腫瘤細胞系中敲降JOSD1的表達 。

病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法
文章圖片
圖1.CTNT心臟特異性更強

病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法
文章圖片
圖2.五種AAV血清型對心臟的感染效率檢測

病毒|【維真生物_病毒包裝】腺相關病毒/AAV在心臟中的應用及注射方法
文章圖片
圖3.不同血清型與不同病毒量感染心臟的效果圖
以上數據來源：《Robust Cardiomyocyte-Specific Gene Expression Following Systemic Injection of AAV: In Vivo Gene Delivery Follows a Poisson Distribution》
實驗動物：1周齡 C57BL/6 小鼠；
注射方式：頸靜脈注射；
血清型：AAV1/AAV2/AAV6/AAV8/AAV9；
病毒量: 不同劑量（3.15×10E9vp；1×10E10vp；3.15×10E10vp；1×10E11vp） ， 體積約20ul；
檢測時間：注射4周后冰凍切片檢測；
4. 維真生物腺病毒相關/AAV部分文章發表（心臟） 4.1 Yin L et al. 2019. FBXL10 regulates cardiac dysfunction in diabetic cardiomyopathy via the PKC β2 pathway. J Cell Mol Med. 23(4): 2558–2567.
4.2 Bing Li et al. 2018. Sirt1 Antisense Long Noncoding RNA Promotes Cardiomyocyte Proliferation by Enhancing the Stability of Sirt1. J Am Heart Assoc. 7(21): e009700.
4.3 Zhong L et al. 2019. SM22α (Smooth Muscle 22α) Prevents Aortic Aneurysm Formation by Inhibiting Smooth Muscle Cell Phenotypic Switching Through Suppressing Reactive Oxygen Species/NF-κB (Nuclear Factor-κB). Arterioscler Thromb Vasc Biol. 39(1):e10-e25.
4.4 Hu Y et al. 2019. Suppression of MicroRNA Let-7i-5p Promotes Cardiomyocyte Proliferation and Repairs Heart Function Post Injury by Targeting CCND2 and E2F2.Clin Sci (Lond).133(3): 425-441.