鄭勤龍主任：系統梳理兒童淋巴瘤分子檢測的意義與方法 _健康小知識

隨著對淋巴瘤發病機制探索的不斷深入，尤其是在分子層面的挖掘逐漸加深，我們愈加體會到分子檢測在精準診斷、分層治療、預后評估、復發監測等全程管理中舉足輕重的作用。近期召開的“全國兒童淋巴瘤協作組（CNCL）第十三期培訓暨學術會議”中，高博診斷中心分子實驗室鄭勤龍主任帶來了“兒童淋巴瘤的分子診斷及預后意義”精彩主題報告，圍繞兒童淋巴瘤分子檢測的必要性、檢測技術和內容選擇、對疾病診治的臨床意義等方面展開了深度解讀，幫助大家全面、深刻理解分子診斷的最新進展和重要價值。
為什么需要分子檢測？
——精細分子分型，精準導航治療
非霍奇金淋巴瘤（NHL）是兒童淋巴瘤中主要的病理類型，其中伯基特淋巴瘤（BL）、淋巴母細胞淋巴瘤（LBL）、彌漫性大B細胞淋巴瘤（DLBCL）和間變性大細胞淋巴瘤（ALCL）分別約占兒童NHL的40%、30%、15%和10% ，其他還包括原發性縱隔大B細胞淋巴瘤（PMBL）、濾泡性淋巴瘤（FL）等少見類型。
分子遺傳學異常是淋巴瘤發生發展的重要驅動因素。以B細胞淋巴瘤為例，從造血干細胞到記憶B細胞或漿細胞的整個發育、分化過程中，如果任何一個環節出現了異常，都可能導致淋巴瘤的發生。隨著分子生物學的發展，學術界對淋巴瘤分子致病機制的認識日益深入（圖1）。

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圖1一些常見淋巴瘤已知的分子致病機制
兒童淋巴瘤在組織病理形態學方面的特征與成人總體相似，但分子特征差異較大。以FL為例，成人患者多伴有表觀遺傳學改變，或IGH與BCL-2融合造成細胞不凋亡；但兒童患者IGH與BCL-2融合較少見，多攜帶TNFRSF14突變，生物學行為偏惰性、預后較好，一般可保守治療。 DLBCL中，兒童患者多為生發中心來源（GCB型），而ABC型少見。可見，在同一種淋巴瘤中，兒童與成人分子機制有些往往大相徑庭，導致預后和治療策略迥異。
從世界衛生組織（WHO）、國際共識分類（ICC）等對淋巴瘤分型的更新中可以看到，分子檢測愈加重要，通過MICM整合診斷、精細分子分型，能夠為臨床提供更精準的預后預測和治療指引。
全面考慮檢測內容
合理選擇檢測技術和方法
淋巴瘤分子異常的常見類型包括染色體異常（結構、數量）、融合基因/大片段基因缺失、基因變異（單個或多個堿基異常，如突變、缺失或插入、擴增/復制、多態性變異）、基因表達異常等。選擇分子檢測內容時需要全面考慮，以免導致漏檢和診斷不準確。檢測手段主要有聚合酶鏈反應（PCR）、毛細管電泳（CE）、二代測序（NGS）等。
NGS在臨床的應用日益廣泛，逐漸成為分子檢測的“主力軍” ，具體臨床檢測實踐中需要做多方面的技術考量。全基因組測序（WGS）、全外顯子組測序（WES）、全轉錄組測序（WTS）數據量龐大、臨床驗證難度較大，目前更多采用特定的panel檢測。 Panel的準確、合理選擇對于分子診斷的預期目的和結果至關重要。
除了NGS以外， PCR、一代測序、染色體微陣列、多重鏈接依賴式探針擴增（MLPA）也可用于淋巴瘤基因變異檢測，需根據擬檢測的變異類型優選技術（表1）。
【鄭勤龍主任：系統梳理兒童淋巴瘤分子檢測的意義與方法】表1淋巴瘤基因變異常見類型及分子檢測方法

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貫穿診療各環節
助力淋巴瘤全程管理
隨著研究數據的積累、淋巴瘤生物標志物的種類和意義不斷豐富，分子檢測的價值也隨之持續拓展，其應用目前已貫穿了診斷、分型、治療指導、療效和預后評估、復發監測等疾病全程管理的各個環節（圖2）。