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Hydromer親水涂層具有降低血栓形成性、細胞增殖和蛋白質吸附性( 五 )

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Hydromer親水涂層具有降低血栓形成性、細胞增殖和蛋白質吸附性
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圖7
圖7：T8B涂層聚氨酯管的長期暴露 。 檸檬酸鹽全人血在室溫下通過未涂覆的(A)和t8b涂層（B ， 僅管腔）聚氨酯管（7.5厘米長）循環8小時 ， 然后在48℃下保存16小時 。 每天更換血液 ， 共計12天 。 然后用PBS洗滌試管 ， 用考馬斯亮藍染色 ， 并在3800處的顯微鏡下檢查 。
如圖7(A)所示 ， 血液成分（細胞和蛋白質）附著在未涂層的管道表面 。 相比之下 ， 被DualityTMT8B包覆的表面對血液蛋白的吸附顯著減少[圖7(B)] 。 用高鹽（0.5M）處理從每個管腔內去除蛋白質 ， 用布拉德福德蛋白法測定 。
我們發現在涂層管表面吸附的蛋白質平均減少了70% 。 然而 ， 我們不能排除殘留的變性蛋白不能從涂層表面去除的可能性 ， 因此不包括在我們的測量中 。 由于該配方是為醫療用途而設計的 ， 因此評估該材料應用于表面后的細胞毒性是重要的 ， 因此是必要的 。 將Dualitytmt8b涂層管或不銹鋼提取到帶有血清的完全組織培養基中 ， 然后使用小鼠L929成纖維細胞在標準的細胞毒性方案（ISO10993）中進行測試 。
Hydromer親水涂層具有降低血栓形成性、細胞增殖和蛋白質吸附性
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表1
表一：DualityTMT8b涂層聚氨酯管對紅細胞溶血的影響
全血在室溫下泵入未涂布和涂層聚氨酯管（ID53mm ， OD54.0mm ， 長度5180mm） ， 指定時間 ， 30mL檸檬酸全血2mL/min 。 在分析時 ， 血液被離心 ， 得到的血漿稀釋1：10 。 然后在540nm處測量吸光度 ， 以估計紅細胞溶血情況 。 納入未暴露于試管的對照組血液進行比較 。 a這個時間框架代表血液被泵入管子 ， 然后在一個周末儲存 。
暴露于細胞72小時后 ， 沒有細胞毒性（數據未顯示） 。 在單獨的實驗中 ， 全血在涂層管的管腔內孵育24小時 ， 并檢查合成的血漿中血紅蛋白的釋放 。 然后再次加入新鮮血液 ， 孵育24小時 ， 重復該序列長達12天（表1） 。 在本研究過程中 ， 對照聚氨酯管和涂有DualityTMT8B的管之間的紅細胞溶血率沒有顯著差異 。
8、討論
在本研究中 ， 我們使用電拋光醫用級不銹鋼和聚氨酯管作為基底 ， 以評價DualityTMT8B配方在降低人血細胞成分表面粘附和HUVEC增殖方面的有效性 。 血管平滑肌細胞是血管壁的主要組成部分 ， 其增殖在動脈閉塞（再狹窄）和動脈粥樣硬化的發展中起著關鍵作用 。 “藥物洗脫”支架的開發大大降低了再狹窄的發生率 ， 并在其上加入了藥物 ， 以減少或防止組織生長 。
在本研究中 ， 我們使用了一個內皮細胞系來評估DualityTMT8B在減少細胞增殖方面的有效性 。 在這方面 ， 人們發現這一提法非常有效 。 這些研究中一個重要的區別是 ， 這種減少的細胞增殖是使用一種不使用有絲分裂抑制劑的配方來完成的 ， 該抑制劑本身是具有細胞毒性的 。
醫用植入物表面的血小板相互作用可能是導致血栓形成的主要因素 。 事實上 ， 據報道 ， 血小板活化是這方面的一個重要因素 。 肝素涂層支架的使用 ， 以及其他藥物的使用 ， 1,6-7已被報道可以有效地降低血栓生成的潛力 。 此外 ， 肝素也被證明可以有效地減少血小板對從氧合器中去除的聚丙烯中空纖維的粘附 。
在涂有親水性潤滑聚合物21的聚乙烯表面也觀察到類似的結果 ， 血小板粘附降低了超過100倍 ， 纖維蛋白原降低了[60%] 。 血小板粘附也被報道在炎癥性疾病的發展發展中起著關鍵作用 。 血小板與頸動脈血管內皮的粘附可觸發動脈粥樣硬化病變的形成 。
然而 ， 目前尚不清楚這一系列相同的事件是否會發生在體內植入的醫療設備上 。 其他材料或化學/生物制劑減少血小板和/或蛋白質在表面粘附的能力 。 例如 ， 涂在不銹鋼上的氧化鈦也被報道具有生物相容性 ， 并能有效地減少血小板的粘附 。 將聚（富馬酸丙烯-共乙二醇）組成的水凝膠薄膜鑄造在玻璃蓋上 ， 使用111銦辛標記的血小板在靜態條件下評估血小板粘附情況 。 在這些條件下 ， 與對照組相比 ， 水凝膠表面的血小板粘附明顯下降 。 聚氨酯被廣泛應用于各種醫療應用 ， 包括導管、血液透析管和其他設備 。