1. 首頁 > 健康養生 > >

《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁出關鍵一步( 二 )

健康知識養生常識


研究人員構建了均含有EGFRL858R/T790M突變的H1975細胞（人肺腺癌細胞）和患者來源的DFCI52細胞異種移植腫瘤模型 ， 以評估JBJ-09-063在體內的作用 。
在H1975模型中 ， JBJ-09-063可使腫瘤體積呈劑量依賴性縮小 ， 并且比JBJ-04-125-02更有效 。 值得注意的是 ， 50mg/kg和100mg/kg劑量的JBJ-09-063與25mg/kg奧希替尼的治療效果相當 。 在DFCI52模型中 ， 50mg/kg劑量的JBJ-09-063與奧希替尼的治療效果相當 。
《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁出關鍵一步
文章圖片
JBJ-09-063在體內對EGFRL858R/T790M突變腫瘤具有良好的治療作用
同樣的 ， 在DFCI52-C797S和H3255GR-C797S細胞構建的異種移植腫瘤模型（對奧希替尼耐藥）中 ， JBJ-09-063同樣具有顯著的治療作用 。
《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁出關鍵一步
文章圖片
JBJ-09-063在體內對EGFRC797S突變腫瘤具有良好的治療作用
但出人意料的是 ， 體外的DFCI52細胞和H3255GR細胞（細胞具有EGFRT790M突變 ， 對吉非替尼耐藥）對JBJ-09-063并不如在體內時那么敏感 ， 而當ATP競爭性EGFR抑制劑吉非替尼與JBJ-09-063聯用后 ， 可顯著抑制DFCI52細胞和H3255GR細胞的生長 。
《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁出關鍵一步
文章圖片
體外的DFCI52細胞對JBJ-09-063耐藥 ， 但和吉非替尼聯用后可顯著抑制細胞生長
同樣 ， 在體內對JBJ-09-063敏感的H3255GR-C797S和DFCI52-C797S（細胞具有EGFRC797S突變 ， 對奧希替尼耐藥）細胞 ， 在體外也對JBJ-09-063耐藥 ， JBJ-09-063和奧希替尼聯用可逆轉這一耐藥性 。
研究人員猜想 ， 這些細胞在體外培養時 ， 必然因某些原因使得EGFR構象改變 ， 使得原本對JBJ-09-063敏感的細胞變得耐藥 ， 而EGFRTKI可以逆轉這一耐藥性 。
經過研究 ， 研究人員發現原來是由于培養基中的ERBB家族配體（如EGF和NRG1）與EGFR結合 ， 導致EGFR與自身或其他ERBB家族成員二聚化 ， 使得JBJ-09-063無法抑制EGFR的磷酸化 ， 從而出現了耐藥性 。 而EGFR-TKI與EGFR的結合抑制了二聚體的形成 ， 從而恢復了細胞對JBJ-09-063的敏感性 。
對奧希替尼耐藥的除了常見的C797S之外 ， 還有一些突變也可導致對奧希替尼耐藥 ， 包括L718Q突變、L792F突變和G796S突變[7] ， 這些突變局限于ATP位點 ， 影響奧希替尼與位點的結合 ， 但理論上不會影響與變構抑制劑的結合 。
《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁出關鍵一步
文章圖片
C797S突變、L718Q突變、L792F突變和G796S突變影響奧希替尼與位點的結合 ， 但理論上不會影響與變構抑制劑的結合
為了驗證JBJ-09-063在這些突變的情況下是否有效 ， 研究人員構建了EGFRLT/L718Q、EGFRLT/L792F和EGFRLT/G796S的BA/F3細胞 ， 并比較了JBJ-09-063和奧希替尼對細胞生長和EGFR的影響 。 實驗結果證實這些突變體細胞確實對奧希替尼耐藥 ， 但對JBJ-09-063的敏感性都更高 ， JBJ-09-063能使這些細胞中EGFR磷酸化水平降低 ， 從而抑制EGFR信號轉導和細胞生長 。 這些實驗表明 ， JBJ-09-063可廣泛有效地治療對奧希替尼耐藥的EGFR突變腫瘤 。
盡管JBJ-09-063對導致奧希替尼耐藥的EGFR突變有效 ， 但很可能存在EGFR突變可介導對JBJ-09-063的耐藥性 。
為了鑒定JBJ-09-063耐藥突變 ， 研究人員用1μMJBJ-09-063、1μM奧希替尼或兩者聯合處理BA/F3細胞來篩選耐藥細胞系（每種用法處理900個細胞克?。?。 在JBJ-09-063和奧希替尼處理的細胞克隆中 ， 分別有76個和13個細胞克隆生長 ， 當兩種藥物一起處理細胞時 ， 沒有任何細胞克隆生長 。
《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁出關鍵一步
文章圖片
篩選對JBJ-09-063耐藥細胞系
通過對76個JBJ09-063耐藥細胞克隆的EGFR酪氨酸激酶（TK）結構域進行測序發現 ， 在76個JBJ09-063耐藥克隆中 ， 3個（3.94%）含有L747S突變 ， 其他73個JBJ-09-063耐藥克隆中沒有發現任何EGFRTK區突變 。