前列腺特異性膜抗原是前列腺癌新輔助強化雄激素剝奪治療后殘留疾病的生物標志物( 二 ) _健康小知識

切除后，對根治性前列腺切除術標本進行粗略檢查，然后根據標準程序對福爾馬林固定和石蠟包埋。將五微米連續的組織切片安裝在帶電載玻片上進行染色或直接用于RNA的回收。福爾馬林固定和石蠟包埋的載玻片使用標準方案用H&E染色。如前所述，對治療病例的殘留腫瘤進行定量。 10,11抗PSMAIHC使用DakM3620在1：500稀釋下進行。補充材料（https://www.jurology.com）中提供了實驗室方法的更多詳細信息。
手動圖像分析
將3mm×3mm網格覆蓋在每個組織切片上，以將組織劃分為方形感興趣區域（ROI）進行分析。使用HALO?圖像分析平臺（新墨西哥州阿爾伯克基的IndicaLabs）進行網格劃分。每個區域都通過PSMA染色和該區域的腫瘤存在進行分類，使用每個ROI中染色或未染色的上皮的總面積對每個網格進行單獨分類，不包括腔腔空間。如果ROI內的大部分腫瘤PSMA呈陽性，并且大多數陽性是腫瘤，則該區域被歸類為“真陽性” 。如果ROI內的大部分腫瘤PSMA為陰性，或者如果陰性染色腫瘤多于陽性染色的非腫瘤，則該區域被歸類為“假陰性” 。如果一個區域的大部分染色陽性是非腫瘤的，則該區域被歸類為“假陽性” 。如果一個區域內沒有腫瘤或染色陽性，則將其歸類為“真陰性” 。 ROI的分類由董事會認證的專家前列腺病理學家（R.T.L.）驗證。用于自動圖像分析的方法在補充材料（https://www.jurology.com）中提供。
統計分析
使用Mac的GraphPadPrism版本9（GraphPadSoftware ，加利福尼亞州圣地亞哥）進行統計分析，使用Pearson或Spearman相關性測量因子之間的關聯。使用Welch的t檢驗對治療和未治療的腫瘤之間，腫瘤和非腫瘤區域之間或ER和INR病例之間的單一因素進行比較。使用2側Fisher的精確檢驗對已治療或未治療的腫瘤與個體二分法因素之間的富集進行零假設檢驗。使用Cochran-Armitage測試進行已治療和未治療腫瘤之間單一因素內協變量的比較。 PSMAIHC用于區分INR和ER病例的準確性使用接收器工作特性曲線進行檢查。統計學顯著性在p<0.05處預先指定。對于已治療和未治療的病例，報告了基于網格的檢測性能，置信區間為95% ，通過隨機抽樣置換患者的2 ， 000個自舉樣本的2.5%和97.5%百分位數獲得。補充材料（https://www.jurology.com）中提供了RNA-seq分析的詳細方法。
結果
針對PSMA的IHC可識別新輔助iADT后的殘留腫瘤
作為2期臨床試驗的一部分，我們在35名患者的隊列中評估了6個月的全身性新輔助iADT后前列腺切除術標本中殘留腫瘤的存在。 10雖然H&E染色通常足以檢測患者的大部分殘留腺癌，但在一小部分病例中進行了抗NKX3.1或PIN-4雞尾酒（高分子量細胞角蛋白， p63和α-甲基酰基-CoA消旋酶）的IHC ，用于檢測單個腫瘤細胞并精確計算治療后腫瘤體積。 11常見的前列腺癌標志物前列腺特異性抗原（PSA）和AR在一部分病例中由于iADT抑制AR而顯示染色減少（圖1 ， A和B），因此在這種治療后環境中沒有那么有用。在許多情況下，滑索標志物NKX3.1的彌漫性染色鑒定出殘留腫瘤（圖1 ， A）。在幾乎所有情況下，使用PSMA抗體進行免疫染色都顯示出殘留腫瘤的強而一致的染色（圖1 ， A和B）。在這些治療后腫瘤中，抗PSMAIHC在良性腺體中較弱（圖1 ， C）。相比之下，來自未接受ADT治療的患者的前列腺切除術標本在良性和腫瘤腺中均顯示出更強的PSMA染色（圖1 ， D）。

文章圖片
圖1.前列腺腫瘤的代表性全玻片和插入顯微照片。 A、抗PSMA殘留腫瘤陽性，抗PSA陰性，抗NKX陽性3.1 。 B ，抗PSMA殘留腫瘤陽性，抗AR彌漫性弱。 C ，顯示的良性腺體區域與PSMA陽性殘留腫瘤細胞相鄰的抗PSMA陰性。 D ，未經治療的前列腺切除組織，良性（頂部）和腫瘤（底部）腺體均染色陽性，以抗PSMA 。顯示H&E以供參考。全幻燈片圖像條：5毫米;插入條：100μm 。