前列腺特異性膜抗原是前列腺癌新輔助強化雄激素剝奪治療后殘留疾病的生物標志物( 四 ) _健康小知識

表2.基于網格的ROI抗PSMA性能摘要，來自手動分析
已處理（95%置信區間）
未經處理（95%置信區間）
準確性
0.85(0.81–0.89)
0.54(0.47–0.61)
敏感性
0.96(0.91–0.99)
0.91(0.84–0.97)
特異性
0.82(0.76–0.87)
0.28(0.22–0.35)
斷續器
0.63(0.48–0.76)
0.47(0.38–0.55)
陰性預測值
0.98(0.96–1)
0.82(0.72–0.92)
95%的置信區間是根據患者水平的2 ， 000個自舉樣本（帶有替代樣本）計算得出的。
為了正交地證實這一發現，我們從每個塊的連續載玻片（包括良性和腫瘤腺，帶有基質細胞）中收集了整個組織，并進行了全轉錄組測序。在兩個隊列中對每個病例進行RNA-seq 。然后將這些本體轉錄組解卷積以獲得腔內上皮細胞特異性基因估計值，而無需區分腫瘤和良性細胞類型。在每個樣本的基礎上，我們將抗PSMA陽性染色評分與編碼PSMA的基因FOLH1（葉酸水解酶1）的相應表達值相關聯。這些關聯在兩個隊列（圖2 ， G和H）中均為強陽性，治療隊列的Pearson相關系數（r）為0.67（95%C.I.0.43-0.82），未經治療的隊列為0.67（95%C.I.0.44-0.81）。因此，我們對組織中PSMA蛋白表達的組織學和低分辨率估計與mRNA表達得出的值成正比，從而驗證了IHC評估PSMA上皮細胞表達的準確性。
影響因素分析
由于治療效果，治療隊列中含有的腫瘤總是較少，并且含有任何腫瘤的ROI的比例明顯低于未經治療的隊列（圖3 ， A ， p=0.006 ， Welch的t檢驗）。在這兩個隊列中，準確率和PPV與載玻片上腫瘤的數量成比例地增加（圖3 ， B），未經治療的腫瘤通過Pearson相關性顯示出更強的比例關系（分別為r=0.80和r=0.92）。接下來，我們從10個不同病例中隨機選擇10個腫瘤和良性腺體的ROI上采用HALO自動圖像分析平臺，并開發了一種細胞分析算法來量化每個細胞的染色強度（圖3 ， C）。在每9毫米內2ROI ，單個PSMA染色的腫瘤細胞比PSMA染色的非腫瘤細胞具有更大的染色面積和染色強度（圖3 ， D）。因此，我們的縮減采樣分析更有可能低估相對于每個細胞的精確注釋的準確性和特異性。

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圖3.評估影響抗PSMA檢測腫瘤細胞準確性的因素。 A ，點圖比較了Welch的t檢驗通過治療和未治療隊列之間的手動分析確定的含有腫瘤的ROI的比例。線表示均值。 B、皮爾遜的相關性是，抗PSMA的準確性只能識別腫瘤細胞（上圖）和PPV的抗PSMA鑒定腫瘤細胞（下圖）作為ROI所含腫瘤的比例的函數，通過人工分析確定。線表示具有95%置信區的線性回歸趨勢。 C ，使用HALO自動分析為每細胞分析選擇的腫瘤（頂部）或非腫瘤（底部）的代表性ROI 。插圖條：100μm 。 D ，通過Welch的t檢驗比較每個HALO每細胞自動分析的染色區域（左），染色強度評分（中）和光密度（右）的點圖。線表示均值。
抗PSMAIHC檢測殘留腫瘤的益處
穩健而徹底地鑒定殘留病灶對于準確定量治療后腫瘤體積至關重要，罕見和分散的單細胞使用H&E和傳統染色劑會帶來嚴重的視覺挑戰。在我們的臨床試驗中， INR腫瘤被定義為體積大于0.05厘米3.10這些病例通常顯示散射的單細胞，其相對頻率與ER腫瘤相同（殘余腫瘤體積小于0.05厘米3).這些散落的細胞很容易通過抗PSMAIHC與良性腺體和基質區分開來（圖4 ， A）。接下來，我們考慮了任何細胞類型的總PSMA染色是否會將ER與INR患者區分開來。通過手動分析測量的腫瘤和非腫瘤的聯合PSMA陽性率在INR中大于ER（圖4 ， B ， p=0.008 ， Welch的t-test），并且已識別出具有更大殘留腫瘤體積的病例，其接收器操作特征曲線下的面積為0.72（圖4 ， C）。